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抑菌率实验所需要的仪器设备和测试方法

返回列表 来源:未知 发布日期:2019-07-26 09:59【
1、实验材料
纤维:黑竹炭纤维,湖南创纯新材料科技有限公司; 藻酸盐纤维,青岛海赛尔新材料科技有限公司。
菌种:EC( 大肠杆菌,ATCC25922),SA( 金黄色葡萄球菌,ATCC6538) ,PSA( 白色念球菌,ATCC10231) ,广东环凯微生物有限公司。
细胞:L-929小鼠成纤维细胞,广州吉妮欧生物科技有限公司。
仪器:电热恒温培养箱;电子天平;二氧化碳培养箱;旋转蒸发器;倒置荧光显微镜;全自动酶标仪;万能试验机。

2、实验方法
敷料制备方法:用赛多利斯电子天平分别称取纯束状黑竹炭纤维、纯藻酸盐纤维以及束状黑竹炭纤维和藻酸盐纤维( 2:1和1:2) 混合纤维,放入开松机中进行开松处理,通过开松机除去纤维中一部分杂质并且将束状纤维尽量打散成单纤维,经过两次开松后,混合成散状的纤维进入压棉箱中加工成均匀的筵棉,筵棉再进入梳理机加工成薄薄的单层纤维网,单层纤维网经过铺网机重复叠铺成蓬松的纤维网,然后通过预刺和倒刺工序对蓬松纤维网进行加固提升复合纤维敷料的力学性能,最后与防粘PE膜、背衬和离型纸进行复合、裁剪,即可得纯活性炭纤维敷料、纯藻酸盐纤维敷料和复合纤维敷料。

吸液量实验:按照 YY/T 0471-2004进行吸液量测定实验,称取8.298gNaCl和0.368gCaCl2·2H2O置于容量瓶中,先用少量去离子水溶解,然后定容lL,配制成试验液A。将各敷料分别裁成5cm×5cm大小,分别称量其质量,记为m0。将敷料分别置于已标号的直径为( 90±5) mm的培养皿中,称取预热至( 37±1) ℃、质量为被测敷料样品40倍的试验液A分别置于对应的培养皿中,在( 37±1) ℃下维持30min后,用镊子夹住敷料样品的一端或一角在空中悬垂30s,分别称量敷料样品的质量,记为m1。计算单位面积敷料的吸液量。重复上述实验3次,求其平均值。单位面积吸液量= (m1-m0 ) g /100cm2 。

保湿性实验:将各纤维敷料裁剪成5cm×5cm大小的方块,将试样放到盛有试验液 A( 8.298gNaCl和0.368gCaCl2·2H2O溶解于1L去离子水中配制而成) 的平皿中浸泡1min,捞起后平铺在塑料板上,置于在温度25℃,湿度65%的条件下,计算各敷料变干所需时间t。

吸附、脱附实验:将各纤维敷料置于苯的饱和蒸汽中,开始时每2min称重一次,当重量变化不大时,每隔5min称重一次,直到吸附达到饱和为止。将上述吸附饱和的样品置于120℃的加热炉中,用氮气吹扫,同样每隔一定时间称重一次,直至重量不再变化为止。

力学性能:按照GB/T24218.3-2010进行断裂强度和断裂伸长率实验,将各纤维敷料裁剪成长度为20cm,宽度为( 5.0±0.05) cm的条状形试样,置于万能试验机的夹具位置,开启机器,以100mm/min的恒定伸长速度拉伸试样制止断裂,记录试样拉伸过程中的断裂强力和断裂伸长率。针对湿态下力学性能,将条状试样在试验液 A( 8.298gNaCl和0.368gCaCl2·2H2O溶解于1L去离子水中配制而成) 中至少浸泡1h,取出试样,去除过量水分,然后按照上述步骤进行测试。

抑菌率试验:按照 GB/T20944.3-2008进行抑菌率实验,将各纤维敷料分别裁剪成1cm×1cm大小,称取磷酸氢二钠2.83g、磷酸二氢钾1.36g,加入烧瓶中,添加蒸馏水定容至1000mL,制成PBS缓冲液1000mL。将裁剪好的纤维敷料样品放入 250mL三角烧瓶中,分别加人已灭菌的70mLPBS缓冲液和5mL菌悬液,使菌悬液的最终浓度为1×104cf/mL。然后用硬皮纸将三角烧瓶封口,固定于振荡摇床上,以300r/min振荡 lh。取0.5mL振摇后的样液,或用PBS做适当稀释后的样液,以琼脂倾注法接种平皿,放入培养箱培养16-24小时,进行菌落计数。
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