新鲜水果皮抗氧化性能等检测方法介绍
来源：未知
发布日期：2019-10-17 16:24【大 中 小】
1、仪器与设备
纯水蒸馏水器SZ-97A，上海亚荣生化仪器厂；WGLL-65BE电热鼓风干燥箱、FW100高速万能粉碎机 天津市泰斯特仪器有限公司；FA1004A电子天平、722S可见分光光度计 上海精天电子仪器有限公司；RE-52AA旋转蒸发器，上海亚荣生化仪器厂；AcquityTM ultraUPLC仪（配备UPLC-Triple-TOF/MS系统） 美国Waters公司；飞行时间质谱（配有电喷雾离子源） 美国ABSCIEX公司；Minispan离心机德国Eppendorf公司；XS105分析天平瑞士Mettler Toledo公司。
2、材料与试剂
新鲜水果（火龙果、香蕉、橘子、香瓜、橙子、芒果、木瓜、哈密瓜、西瓜、菠萝、柠檬、山竹、猕猴桃、桂圆、葡萄、榴莲、菠萝蜜、石榴、百香果、荔枝、牛油果）购于吉林市大润发超市。福林酚试剂天津市大茂化学试剂厂；没食子酸、鞣酸、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼、2,2-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸美国Sigma公司；2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚、芦丁（生化试剂） 国药集团化学试剂有限公司；胃蛋白酶美国GenView公司；胰蛋白酶北京鼎国昌盛生物技术有限责任公司；猪胆酸钠上海如吉生物科技有限公司；MD44透析袋北京索莱宝科技有限公司。
3、方法
材料预处理：新鲜水果冲洗干净，去果肉，留皮，置于鼓风干燥箱中45℃下烘干，粉碎，过80目筛，收集备用。果皮提取物制备：称量烘干后的果皮粉各1.000g，将各样品中加入15mL体积分数为70%的乙醇溶液，超声提取30min，收集提取液。按上述步骤进行3次超声提取，将提取液置于上海亚荣旋转蒸发器中旋蒸浓缩，用上海亚荣纯水蒸馏水器制备的蒸馏水定容至50mL。
果皮提取物中酚类物质含量测定：总酚含量测定采用Folin-Ciocalteu测定法，分别取0.2mL待测样品溶液于试管中，加入2.5mL0.1mol/L的福林-酚试剂，5min后加入2.5mL7.5g/100mLNa2CO3溶液，水浴30min，取出于725nm波长处测定吸光度空白组以蒸馏水替代。每组平行测定3次。
4、总黄酮含量测定
总黄酮含量测定采用的方法，略作修改。分别吸取0.5mL待测样品溶液于试管中，加入上海亚荣纯水蒸馏水器制备的2mL蒸馏水及0.15mL5g/100mLNaNO2溶液，6min后加入0.15mL10g/100mLAl(NO3)3溶液；6min后再加入2mL1.0mol/LNaOH溶液和0.2mL蒸馏水，静置15min，于510nm波长处测吸光度（A510nm）。空白组以蒸馏水替代。以A510nm为纵坐标（y2）、芦丁标准品质量浓度为横坐标（x2），绘制标准曲线，得芦丁标准曲线方程为：y2＝0.644 6x2+0.1726（R2＝0.9991），根据标准曲线计算样品中总黄酮含量。
5、抗氧化活性测定
DPPH自由基清除能力测定：参照方法，取1mL不同质量浓度的果皮提取物，加入3mL0.2mmol/L的DPPH乙醇溶液，混匀后加入4.0mL乙醇，室温下避光反应30min后于517nm波长处测定吸光度（A517nm）。空白组以蒸馏水替代。按式计算样品的DPPH自由基清除率。
以上内容仅供大家参考，欢迎大家咨询购买上海亚荣旋转蒸发器等仪器。
