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上海亚荣介绍提取鱼腥草素所需仪器

返回列表 来源:未知 发布日期:2019-09-28 11:58【
上海亚荣介绍提取鱼腥草素所需仪器,简单介绍了鱼腥草素提取的简单方法:以乙醇作为溶剂,利用提取法从鱼腥草中提取鱼腥草素,并提纯去杂,得到纯度较高的鱼腥草素。
1、实验部分
实验试剂:右江流域道地中药鱼腥草,无水乙醇(AR),氯仿(AR),三种肿瘤细胞(Hepg-2(人肝肿瘤细胞),MG-63(人骨肉瘤细胞),TCA(人舌癌细胞)由本校科学实验中心提供),DMEM培养液,胎牛血清,0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液,CCK-8溶液,葡萄糖测试盒(南京建成,006)。
2、实验仪器
SH-3型恒温加热磁力搅拌器,上海亚荣RE-52型旋转蒸发器,TMP-1电子分析天平,SHZ-III循环水用真空泵(上海亚荣生化仪器厂),多功能酶标仪(德国伯托,型号LB941),荧光倒置生物显微镜(徕卡,型号DMIL-FL)。
3、实验方法
鱼腥草素提取:
1)称取10g粉末干燥鱼腥草于烧杯中,加入50%乙醇溶液溶解,在60℃恒温下,于恒温搅拌器中加热65 min。
2)加热结束后,将所得提取物液进行真空过滤。
3)将过滤后的滤液转入旋转蒸发器内进行加热,真空蒸发器,得到鱼腥草的浓缩液。
4)将浓缩液冷却后转入分液漏斗中,然后再加入氯仿去除浓缩液中的杂质。
5)将去杂后的浓缩液进行干燥,最后得到鱼腥草素提取物。
4、细胞培养
将Hepg-2(人肝肿瘤细胞),MG-63(人骨肉瘤细胞),TCA(人舌癌细胞)三种细胞分别置于完全培养基中培养(90 %的DMEM高糖培养基,10%胎牛血清),放置于培养箱中培养至对数生长期,消化,计数,接种于96孔板(接种密度为5×103/孔)或24孔板中(接种密度为1×104/孔)。
细胞生长抑制率测定:采用CCK-8试剂盒测定细胞活力。将Hepg-2(人肝肿瘤细胞),MG-63(人骨肉瘤细胞),TCA(人舌癌细胞)分别接种于96孔板中,100微升/孔培养24h,分组为:空白组(只加DMEM高糖培养);鱼腥草提取物(0.2mg/L,0.4mg/L,1.2mg/L,2.0mg/L,0.2g/L,2.8 mg/L)不同剂量组。相同组别设置4个孔,每个孔重复检测吸光度值3次。鱼腥草醇提取物使用DMEM高糖培养液稀释溶解,药物干预后继续培养24h后,每孔加入3μL的CCK-8溶液,培养箱中孵育3h,然后采用酶标仪于450nm处,测定吸光度值。计算细胞存活率:细胞存活率(%)=(1-(A药物组/A空白组)×100%。 统计学处理以SPSS17.0统计软件包进行统计学分析,计量资料结果用x±s表示,各组间比较采用方差分析,以P<0.05为差异有统计学意义。由单因素实验和基于Box-Benhnken试验原理实验,建立响应面数学模型分析得到超声提取橘皮黄色素辅助工艺的优化工艺。通过温度及常见金属离子的稳定性实验,发现橘皮黄色素具有良好的性能,常温下对温度不敏感,常见金属离子如Na+、K+、Fe3+、Cu2+离子,只有Fe3+离子对色素有破坏作用,说明该黄色素适用于日常用途,但不宜用铁罐贮存。
好了,现在大家都知道鱼腥草素提取需要哪些仪器了吧,欢迎大家来咨询购买上海亚荣生化仪器厂的生产的旋转蒸发器RE-52。现货促销,性价比高。